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          服務電話: 400-9631-028
          基爾頓生物科技 JRDUN BIOTECHNOLOGY
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          Products 病理學實驗
          產品名稱: 免疫熒光
          型號:
          時間: 2014 - 10 - 30
          一、服務介紹免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。 二、實驗原理將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。 三、實驗流程免疫熒光單標記方法免疫熒光單標記是指只標記一種蛋白質分子,方法比較簡單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會直接影響染色結果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a, 培養在蓋玻片或玻璃培養皿中融合程度達到60%-70%的細胞。b, 一抗、FITC或TRITC標記的二抗。c, 4%多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液 (-20℃預冷20 min)。d, 封閉液。e, 0.01mol...
          產品名稱: 免疫組化
          型號:
          時間: 2014 - 10 - 31
          免疫組化是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。 免疫組化的分類: 免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法等。 免疫組化主要步驟:1.洗載玻片2.包埋組織3.切片4.撈組織5.脫蠟6.抗原修復7.血清封閉8.加一抗9.加二抗10.加SABC11.加顯色劑12.復染13.脫水14.封片 服務內容:包含抗體,包埋,切片,染色以及拍照。(每個樣本提供一張照片包含陽性面積)加拍另外計費。
          產品名稱: HE染色
          型號:
          時間: 2014 - 11 - 01
          常規染色或HE(Haematoxylin and eosin)染色。它是病理技術中常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發現尋求別的輔助方法,以達到準確,完整的病理診斷。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中基本、使用廣泛的技術方法。 HE染色步驟:一般包含取材固定,脫水透明,浸蠟包埋,切片與貼片,脫蠟染色,脫水透明,封固等步驟。HE染色服務內容1.包埋,切片,染色,拍照等2.其他特殊染色,如普魯士染色,Masson染色等 目前,基爾頓生物科技(上海)有限公司,主營實驗技術服務,歡迎廣大科研愛好者前來咨詢選購!
          產品名稱: Timm染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹Timm染色方法是一種能夠顯示組織細胞內重金屬分布的常用方法。苔蘚纖維末端是腦內含鋅量高的區域,因此可以用此方法顯示苔蘚纖維末梢分布的情況。 二、實驗原理Timm法是對離子狀態、 疏松結合或螯合狀態下的鋅離子染色,便于光、電鏡的觀察。 三、實驗流程:1.切片貼附于多聚賴氨酸處理過的載玻片上,-20°保存。2.做的時候拿出來晾干,約10分鐘。3.把Timm顯影劑倒入修復盒中,放在在26℃的水浴箱或恒溫搖床里染色90-150 min,染色應該在避光的條件下進行。4.染色后,切片用蒸餾水沖洗幾遍,可以尼式染色復染,也可不復染。5.晾干,中性樹脂封膠片。 四、客戶提供樣本 五、公司提供圖片,結果及分析實驗周期:3-4周
          產品名稱: Masson染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹Masson染色用于膠原纖維和肌纖維的染色及鑒定;染色結果:膠原纖維呈藍色、肌纖維呈紅色、細胞核呈藍黑色。 二、實驗原理1.膠原纖維是人體中的結締組織的主要成分,分布在全身的各個部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質是具有韌性及緊固性,因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細不等的束,呈波浪狀。膠原纖維由許多根纖細的膠原纖維組成。在電鏡下膠原原纖維又由更細的原纖維構成。根據Kramen和Little所進行的電鏡研究證實,膠原纖維是特有的,具有橫紋的(重復期為650)原纖維。當有病變時這些纖維可發生變形,常出現的就是膠原纖維的壞死,膠原纖維在稀酸里可發生膨脹,變成膠樣物。它們能被酸性染料染成深淺不一的粉紅色,這些往往跟淀粉樣物難以區別。由于它們的屈光率較弱,因而在光學顯微鏡下,很難與纖維區別。膠原纖維的分子長度約為3000,直徑約為14,分子量為300000。 2.膠原纖維的組成:1) 細胞內合成前膠原蛋白分子,成纖維細胞攝取合成蛋白質所需的氨基酸,包括脯氨酸、賴氨酸和甘...
          產品名稱: 原位雜交
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。 原位雜交實驗步驟:前期胚胎的制備。原位雜交開始的一天進行重新水化和固定、預雜交、雜交。原位雜交次日進行 1 將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。3置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。4置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復一次。5用MABT洗兩次,每次五分鐘,放在搖床輕輕搖動。6室溫下加1ml 1:2:7溶液,時間為一小時。 7 按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連地高辛抗體,4C 冰箱過夜。原位雜交第三天進行1) 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMAB...
          產品名稱: 透射電鏡檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用頗為廣泛的一類電鏡。通過發射電子束從而穿過超薄的樣品,同時與樣本相互作用,既而形成圖像。透射電鏡具有分辨率高和放大倍數高的優點。其分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數為幾萬到幾十萬倍。目前透射電鏡已經廣泛的應用到癌癥研究,病毒學研究,微生物學,細胞學研究等生物領域。 二、實驗原理透射電鏡是以電子束透過樣品經過聚焦與放大后所產生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察。電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關,因此可以形成明暗不同的影像。由于電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,制備超薄切片(通常為50~100 nm)。要在機體死亡后的數分鐘內取材,組織塊要小(1mm3以內),常用戊二醛和鋨酸雙重固定,包埋介質包埋,用超薄切片機切成薄片,再經醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色。 三、實驗流程1.取材2.固定3.脫水4.包埋5.固化6.超薄切片機切片(50-60 nm)7.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色8.透射電鏡觀察,拍片...
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          服務介紹1)技術原理:石蠟切片(paraffin section)是組織學常規制片技術中為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中?;畹募毎蚪M織多為無色透明,各種組織間和細胞內各種結構之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區別出;組織離開機體后很快就會死亡和產生組織腐敗,失去原有正常結構,因此,組織要經固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,而能清晰辨認其形態結構。冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷 2)特點:石蠟切片標本可以長期保存使用,為性顯微玻片標本。冰凍切片制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷.組織變化不大,能很好保存脂肪,類脂等成分。能...
          產品名稱: 掃描電鏡
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹 掃描電鏡是1965年發明的較現代的細胞生物學研究工具,它具有制樣簡單、放大倍數可調范圍寬、圖像的分辨率高、景深大等特點。近年來,掃描電鏡已廣泛地應用在生物學、醫學、等學科的領域中。 二、實驗原理 主要是通過發射電子聚焦光束來掃描樣品的表面形態.電子束與樣品表面的樣子發生作用,產生多種能夠被檢測的信號,這些信號就包含了樣品的表面形態和組成.染色。 三、實驗流程1. 樣品的初步處理a.取材樣品面積可達8mm×8mm,厚度可達5mm。對于易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等,可固定在濾紙或卡片紙上,以充分暴露待觀察的組織表面。b.樣品的清洗(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗;(2)用5%的蘇打水清洗;(3)用超聲震蕩或酶消化的方法進行處理。c. 固定固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同,常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大,固定時間應適當延長。也可用快速冷凍固定。d. 脫水樣品經漂洗后用逐級增高濃度的酒精或丙酮脫水,然后進入中間液,一般用醋酸異戊酯作中間液。2. 樣品的干燥a.空氣干燥法空氣干燥法又稱自然干燥法,就是將經過脫水的...
          產品名稱: 尼氏染色
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          一、服務介紹尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神經生物學家廣泛使用的一種Nissl染色液,用于石蠟或冰凍切片神經元細胞漿中的尼氏小體(Nissl body)染色。Nissl染色是以德國的精神病學家和神經病理學家Franz Nissl的名字命名的。 二、實驗原理Nissl染色液染色后呈藍紫色,常用于顯示腦或脊髓的基本神經結構。Nissl小體大而數量多,說明神經細胞合成蛋白質的功能較強;相反在神經細胞受到損傷時,Nissl小體的數量會減少甚至消失。Nissl染色液染色的有效成分是堿性染料焦油紫(Cresyl violet),又名甲酚紫和克紫,它可以和RNA或DNA結合,可以染色粗面型內質網上的核糖體,也可以染色細胞核。染色后使細胞體呈現斑駁的(mottled)藍紫色染色。也可以用thionine (硫荲);tolridine blue (甲苯胺藍)等堿性染料。 三、實驗流程:1.樣本處理2.尼氏染色:染色3-10分鐘,蒸餾水洗滌2次(每次數秒鐘即可),95%乙醇約5s3.脫水、透明、封片 四、客戶提供樣本 五...
          產品名稱: 激光共聚焦
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代先進的細胞生物醫學分析儀器之一。 激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope)是20世紀80年代中期發展起來并得到廣泛應用的新技術 ,它是激光、電子攝像和計算機圖像處理等現代高科技手段滲透,并與傳統的光學顯微鏡結合產生的先進的細胞分子生物學分析儀器,在生物及醫學等領域的應用越來越廣泛,已經成為生物醫學實驗研究的必備工具 。 共聚焦顯微鏡用激光作為光源,采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖像處理觀察、分析和輸出。 其特點是可以對樣品進行斷層掃描和成像,進行無損傷觀察和分析細胞的三維空間結構. 主要應用:在細胞及分子生物學基礎研究中的應用,在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用,在血液病學和醫學免疫學研究中的應用,在大腦和神經科學中的應用,在眼科研究中的應用,在骨科研究領域中的應用。 服務內容:激光掃描共聚焦顯微鏡檢測,激光透射共聚焦顯微鏡檢測。組織和細胞中的定量熒光測定,細胞間通訊的研...
          產品名稱: TUNEL檢測
          型號:
          時間: 2017 - 03 - 29
          TUNEL檢測的原理:細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder?;蚪MDNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC)標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。TUNEL檢測(石蠟切片)取下適當的新鮮的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運輸;TUNEL檢測(冰凍切片)取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運輸,固定好的切片應于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測;TUNEL檢測(細胞爬片)細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,盡快用于檢測 ...
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